Souhrn údajů o přípravku
1. NÁZEV PŘÍPRAVKU
Indium (In111) Oxinate
Katalogové číslo Mallinckrodt
Medical: DRN 4908
2. SLOŽENÍ KVALITATIVNÍ I KVANTITATIVNÍ
Obsah lahvičky k datu a hodině
kalibrace / ml:
111In Indii oxinum 37 MBq
8-hydroxyquinolonum 0,025 mg
111In se přeměňuje elektronovým
záchytem s poločasem asi 67 hodin (2,8 dne) za emise záření gama s energií 172
keV (91 %) a 246 keV (94 %). Vnitřní konverzí vzniká záření rentgenové s
energií 23 keV a 26 keV.
3. LÉKOVÁ FORMA
Roztok pro značení.
4. KLINICKÉ ÚDAJE
4.1. Indikace
Indium(111In) oxin je
využíván pro značení separovaných krevních elementů in vitro. Po následné
intravenózní aplikaci je možné označené krevní elementy využít pro vyšetřování
na rozličné účely za použití patřičných zobrazovacích nebo měřících metod.
Vyšetřování pomocí značených
krevních elementů indiem(111In):
111In-značené leukocyty nebo
granulocyty: vyšetřování zánětlivých ložisek a abscesů jako doplněk k ostatním zobrazovacím
metodikám, např. lokalizace fokální infekce - abdominální absces, potvrzení
infekce kosti po protéze, vyšetřování při horečce neznámé etiologie a hodnocení
neinfekčních zánětlivých procesů, např. zánětlivé onemocnění střev. V oblasti
červené krevní dřeně skeletu může přítomná osteomyelitida způsobit ložiskové
snížení vychytání leukocytů značených indiem(111In). Difúzní nebo
lokální vychytání leukocytů značených indiem(111In) v plících je
nutné pečlivě hodnotit vzhledem k možnosti fyziologického vychytání v
okrajových oblastech plic.
Trombocyty značené 111In:
určování přežívání trombocytů a jejich biodistribuce, zejména zjišťování
vychytání ve slezině a játrech v případě trombocytopenie; arteriální nebo cévní
trombóza, aneurysmata a zánětlivá ložiska při rejekci transplantovaných orgánů
(např. ledvin a slinivky břišní).
Erytrocyty značené 111In:
Zjišťování lokalizace gastrointestinálního krvácení.
4.2. Dávkování a způsob podání
Lahvička obsahuje sterilní
izotonický roztok pro in vitro značení krevních elementů, které se následně
aplikují intravenózně.
Leukocyty nebo granulocyty značené
111In:
Doporučená aktivita pro dospělé a
starší osoby je 7,4 - 30 MBq intravenózní aplikací.
Scintigrafické zobrazení pro určení
ložiskové akumulace značených leukocytů je možné provést již za 3 - 6 hodin po
aplikaci. Nejvýhodnější pro zobrazení akumulace je však scintigrafie za 24hodin
od aplikace.
Trombocyty značené 111In:
Doporučená aktivita pro dospělé a
starší osoby je 1,85 - 3,7 MBq pro studie přežívání trombocytů a 3,7 - 18,5 MBq
pro studie biodistribuce trombocytů. V obou případech se označené trombocyty
aplikují intravenózně.
Intervaly a počet odebíraných vzorků
pro určování přežívání trombocytů závisí na účelu vyšetření a předpokládané
průměrné hodnotě přežívání. Doporučuje se provádět odběr vzorků nejméně po 20
minutách, dále za 2, 3 a 4 hodiny a poté denně po dobu 10 dní od aplikace.
Scintigrafické vyšetření depozice
značených trombocytů je možné provádět za 2 - 6 hodin od aplikace. Doporučuje
se provádět zobrazení opakovaně až do 48 nebo 72 hodin od aplikace.
Erytrocyty značené 111In
Doporučená aktivita pro dospělé a
starší osoby je 3,7 - 18,5 MBq intravenózní aplikací.
Aplikace dětem:
Dávku k aplikaci dětem je možné určit
na základě dávky pro dospělého upravenou podle tělesné hmotnosti, povrchu těla
nebo věku dítěte. V případě novorozence nebo dítěte mladšího 1 roku je nutno
vzít v úvahu také velikost sledovaného orgánu vzhledem
kvelikosti těla.
U dětí mladších 1 roku se doporučuje
minimální aktivita ve výši 10 % aktivity pro dospělého v zájmu zabezpečení
potřebné kvality zobrazení (viz bod Dozimetrické údaje).
4.3. Kontraindikace
Nejsou známy.
4.4. Zvláštní upozornění
Obsah lahvičky přípravku Indium
(In111) Oxinate je určen pouze ke značení separovaných krevních elementů a není
možné ho aplikovat přímo pacientovi !
Manipulace s radiofarmaky je možná
pouze kvalifikovaným personálem s příslušným povolením pro využívání
radioizotopů.
Manipulace s radiofarmaky a jejich
aplikace je možná pouze osobami patřičně kvalifikovanými na pracovištích k tomu
určených. Při skladování, přípravě a aplikaci radiofarmak a likvidaci odpadu je
nutno dbát jak zásad ochrany zdraví před ionizujícím zářením vyplývajících z
příslušných předpisů a vyhlášek, tak pokynů místních orgánů hygienické služby.
Odkazy odborné literatury ohledně
klinického využití krevních elementů značených 111In se téměř vždy
týkají studií s aplikaci značených autologních krevních elementů. Rizika při
aplikaci buněk dárce jsou zřejmá.
4.5. Interakce
Byl hlášen vliv kortikoidů a
antibiotik způsobující snížení vychytání značených trombocytů v abscesu,
ale tento účinek není dosud uspokojivě zdokumentován. U terapeuticky
účinnýchantibiotik je možné očekávat snížení migrace leukocytů vlivem snížené
chemotaxe.
4.6. Těhotenství a laktace
Pro krevní elementy značené indiem(111In)
a připravované pomocí indium oxinu nejsou k dispozici údaje o použití v
těhotenství. Podle zkoušek na zvířatech existují určité poznatky
oteratogenitě india.
Pokud je nezbytné aplikovat
radioaktivní látku ženám v reprodukčním věku, je nutno vždy pátrat po možném
těhotenství. Každá žena, které vynechala menstruace, je v tomto kontextu
považována za těhotnou pokud se neprokáže opak. Kde trvá nejistota, radiační
zátěž pacientky musí být minimalizována při zachování klinického přínosu
vyšetření. Je nutno uvážit alternativní metodiky bez ionizujícího záření.
Aplikace radiofarmaka těhotným ženám
způsobí i radiační zátěž plodu. Proto se nezbytná vyšetření provádějí v
případě, že předpokládaný přínos vyšetření převáží možná rizika pro matku a
plod. Aplikace 30 MBq leukocytů značených indiem(111In) způsobí
radiační zátěž dělohy ve výši 3,6 mGy. Aplikace 18,5 MBq trombocytů značených
indiem(111In) způsobí radiační zátěž dělohy ve výši 1,8 mGy. Dávky
0,5 mGy jsou již považovány za potenciálně rizikové pro plod.
Ženám v reprodukčním věku se
těhotenství nedoporučuje do té doby, než vypočtená dávka pro dělohu není nižší
než 0,5 mGy.
Před aplikací kojícím ženám je nutné
uvážit, zda je možné vyšetření odložit na dobu, kdy bude kojení ukončeno a zda
je vzhledem k možnosti sekrece do mateřského mléka dané radiofarmakum vhodné.
Je-li aplikace nezbytná, je nutné kojení přerušit a mléko, které se v prsu
vytvoří, je nutno odsát a znehodnotit. Kojení je možné obnovit za předpokladu,
že úroveň v mléku nezpůsobí radiační zátěž dítěte vyšší než 1mSv.
4.7. Možnost snížení pozornosti při řízení motorových vozidel a obsluze
strojů
Nejsou známy.
4.8. Nežádoucí účinky
Bylo hlášeno minimální množství
nežádoucích účinků po aplikaci krevních elementů značených 111In,
které zahrnovaly hypersenzitivní reakci spočívající v kožních projevech a
v celkových účincích anafylaktické povahy. Je nutné upozornit na
skutečnost, že hypersenzitivní reakce mohou být způsobeny i pomocnými látkami
použitými při separaci buněk. Před zpětnou aplikací je nutné zabezpečit
důkladné promytí buněk pro odstranění všech pomocných látek přítomných v
sedimentu.
Vystavení pacienta ionizujícímu
záření musí být vždy odůvodněné v souvislosti s přínosem vyšetření. Aplikovaná
aktivita musí být co nejmenší aniž je ovlivněn správný výsledek vyšetření.
Vystavení účinkům ionizujícího
záření je vždy spojeno s rizikem vzniku nádorových procesů a s možným vznikem dědičných
poškození. Pro vyšetřovací metody nukleární medicíny je frekvence těchto
nežádoucích účinků nízká vzhledem k nízké radiační zátěži pacientů.
Pro většinu vyšetření metodami
nukleární medicíny je efektivní dávkový ekvivalent nižší než 20 mSv. Nicméně v
daných klinických souvislostech mohou být i vyšší dávky odůvodněné.
4.9. Předávkování
V případě předávkování krevními
elementy značenými 111In jsou možnosti léčby velmi omezené,
eliminace radionuklidu z těla je závislá na přirozeném zániku buněk.
5. FARMAKOLOGICKÉ VLASTNOSTI
5.1. Farmakodynamické vlastnosti
V rámci běžně aplikovaných aktivit
nevykazují krevní elementy značené indiem(111In) žádný
farmakologický účinek.
5.2. Farmakokinetické vlastnosti
Indium vytváří saturovaný komplex
(1:3) s 8-hydroxychinolonem (oxinem). Komplex je neutrální a jeho lipofilita
umožňuje průchod přes buněčnou membránu. Uvnitř buňky se indium pevně váže na
složky cytoplasmy a uvolněný hydroxychinolon se uvolňuje z buňky. Předpokládá
se, že mechanismus značení buněk pomocí indium(111In) oxinu spočívá
pravděpodobně ve výměnné reakci mezi nosičovým hydroxychinolonem a
subcelulárními složkami, které vytvářejí s indiem pevnější chelátovou vazbu.
Tuto teorii potvrzuje i nízká konstanta stability pro komplex india s oxinem (asi
1010).
Krevní elementy značené indiem(111In)
jsou po aplikaci distribuovány v organismu způsobem shodným jako elementy
neznačené a tím umožňují zobrazení ložisek s akumulací.
Značené leukocyty jsou po aplikaci
dobrovolníkům asi ze 60 % ihned vychytány v játrech, slezině, kostní dřeni a
ostatních tkáních. Akumulace v plících je přechodná a velmi krátká. Zbytek je
odstraňován z krevního oběhu clearance exponenciálního charakteru s poločasem 5
- 10 hodin. Konečná akumulace je asi 20% v játrech, 25% ve slezině, 30% v
kostní dřeni a 25% v ostatních orgánech.
Clearance z krevního oběhu a
biodistribuce může významným způsobem kolísat podle daného pacienta, stavu
označených buněk a použitých metodách pro značení.
Leukocyty značené indiem(111In)
se akumulují v zánětlivých ložiskách a v abscesech.
Erytrocyty značené indiem(111In)
jsou velké buňky a po aplikaci se chovají jako neznačené erytrocyty. Zůstávají
v krevním oběhu a jsou odstraněny pouze z důvodu poškození nebo vlivem ztráty
během krvácení. Indium(111In) se pevně váže na erytrocyty a za
normálních okolností prakticky nedochází k žádnému uvolňování do střeva a tím
umožňuje zobrazení krevního oběhu až do 72 hodin po aplikaci. Značené
erytrocyty zobrazí přítomnost a/nebo ložisko okultního gastrointestinálního
krvácení.
Po intravenózní aplikaci trombocytů
značených indiem(111In) je část rychle vychytána v játrech a slezině
v souladu fyziologicky vysokou koncentrací trombocytů. Zbývající část zůstává v
krevním oběhu po dobu danou životností trombocytů.
Asi 30 % aplikované dávky je ihned
uloženo ve slezině a asi 10 % v játrech. Zbývající aktivita je z krevního oběhu
odstraňována s poločasem asi 4dny a je distribuována s asi 5 % ve slezině, 20 %
v játrech, 25 % v kostní dřeni a 10 % v ostatních tkáních.
Za normálních okolností je přežívání
trombocytů asi 9 dní a dále dochází k jejich odstranění v závislosti na stáří,
zejména ve slezině a kostní dřeni. Kratší doba přežívání je spojena
s různými onemocněními, jako např.
trombocytopenie.
Trombocyty značené indiem(111In)
se také akumulují v ložiskách aktivní tvorby trombů a při počínající rejekci po
transplantaci.
Clearance aktivity z jater a sleziny
pro značené leukocyty a trombocyty je velmi pomalá. Exkrece aktivity močí i
stolicí je velmi nízká. Eliminace z organismu spočívá pravděpodobně zejména v
přeměně radioizotopu na stabilní kadmium. Pro účely dozimetrických výpočtů se
však předpokládá analogie celotělové clearance s indiem v iontové formě
(poločas 70 dní).
5.3. Preklinická data ve vztahu k bezpečnosti přípravku
Bylo zjištěno, že krevní elementy
značené indiem(111In) a připravované pomocí 111In-oxinu
jsou po označení viabilní a jsou fyziologickými cestami distribuovány v
organismu. Byly hlášeny určité chromozomové aberace pro leukocyty značené
indiem(111In) a připravované pomocí 111In-oxinu.
Předpokládá se, že následně po
označení je 8-hydroxychinolon uvolňován z buněk a je spolu s volným 111In
odstraněn během procesu čištění před aplikací.
Na provedených studiích nebyly
nicméně zaznamenány žádné známky toxicity v souvislosti s aplikací indium(111In)
oxinu krysám v množství 0,3 mg oxinu/kg.
5.4. Dozimetrické údaje
Údaje jsou převzaty z ICRP 53,
International Commission on Radiological protection: "Radiation dose to
Patients from Radiopharmaceuticals", Pergamon Press, 1988, (Annals of
ICRP, vol.18, 1-4, 1987).
Leukocyty značené 111In:
Absorbovaná dávka na jednotku
aplikované aktivity (mGy/MBq):
orgán dospělý 15 let 10 let 5 let 1
rok
Nadledviny 3,1E-01 4,0E-01 5,9E-01
8,2E-01 1,4E+00
Stěna moč.
měchýře 7,2E-02 1,0E-01 1,6E-01
2,4E-01 4,1E-01
Povrch
kostí 3,5E-01 5,0E-01 8,0E-01
1,4E+00 2,9E+00
Prsní
žlázy 9,0E-02 9,0E-02 1,5E-01
2,3E-01 3,9E-01
GIT:
stěna žaludku 2,8E-01 3,3E-01 4,9E-01
6,8E-01 1,1E+00
tenké střevo 1,6E-01 1,9E-01 2,9E-01
4,3E-01 7,1E-01
tlusté
střevo
horní část 1,6E-01 1,9E-01 3,0E-01
4,7E-01 7,8E-01
dolní část 1,3E-01 1,6E-01 2,4E-01
3,3E-01 5,4E-01
Srdce 1,7E-01 2,1E-01 3,0E-01
4,3E-01 7,3E-01
Ledviny 3,3E-01 3,9E-01 6,0E-01
8,7E-01 1,4E+00
Játra 7,1E-01 8,8E-01 1,3E+00
1,8E+00 3,2E+00
Plíce 1,6E-01 2,1E-01 3,1E-01
4,6E-01 8,1E-01
Vaječníky 1,2E-01 1,7E-01 2,4E-01
3,5E-01 5,6E-01
Slinivka
břišní 5,2E-01 6,1E-01 9,1E-01
1,3E+00 2,1E+00
Červená
kostní dřeň 6,9E-01 8,8E-01 1,3E+00
2,3E+00 4,5E+00
Slezina 5,5E+00 7,6E+00 1,1E+01
1,7E+01 3,0E+01
Varlata 4,5E-02 6,4E-02 9,9E-02
1,5E-01 2,8E-01
Štítná
žláza 6,1E-02 9,0E-02 1,3E-01
2,1E-01 3,8E-01
Děloha 1,2E-01 1,4E-01 2,1E-01
3,0E-01 5,0E-01
Ostatní
tkáně 1,1E-01 1,4E-01 2,0E-01
3,0E-01 5,3E-01
Efektivní dávkový 5,9E-01 7,9E-01 1,2E+00 1,8E+00 3,2E+00
ekvivalent (mSv/MBq)
Trombocyty
značené 111In:
Absorbovaná
dávka na jednotku aplikované aktivity (mGy/MBq):
orgán dospělý 15 let 10 let 5 let 1
rok
Nadledviny 3,7E-01 4,7E-01 7,2E-01
1,0E+00 1,8E+00
Stěna
moč. měchýře 6,6E-02 9,2E-02 1,4E-01
2,2E-01 3,9E-01
Povrch
kostí 2,3E-01 3,2E-01 5,1E-01
8,7E-01 1,8E+00
Prsní
žlázy 1,0E-01 1,1E-01 1,8E-01
2,9E-01 4,9E-01
GIT:
stěna žaludku 3,5E-01 4,1E-01 6,0E-01
8,3E-01 1,4E+00
tenké střevo 1,4E-01 1,7E-01 2,7E-01
4,2E-01 7,4E-01
tlusté
střevo
horní část 1,4E-01 1,8E-01 2,9E-01
4,7E-01 8,0E-01
dolní část 9,7E-02 1,3E-01 2,0E-01
2,9E-01 5,0E-01
Srdce 3,9E-01 4,8E-01 7,1E-01
1,0E+00 1,8E+00
Ledviny 4,1E-01 5,0E-01 7,6E-01
1,1E+00 1,8E+00
Játra 7,3E-01 9,1E-01 1,3E+00
1,9E+00 3,4E+00
Plíce 2,8E-01 3,6E-01 5,5E-01
8,5E-01 1,5E+00
Vaječníky 9,8E-02 1,3E-01 2,0E-01
3,1E-01 5,3E-01
Slinivka
břišní 6,6E-01 7,5E-01 1,1E+00 1,6E+00 2,6E+00
Červená
kostní dřeň 3,6E-01 4,6E-01 6,8E-01
1,1E+00 2,1E+00
Slezina 7,5E+00 1,0E+01 1,5E+01
2,3E+01 4,1E+01
Varlata 4,3E-02 6,0E-02 9,1E-02
1,4E-01 2,7E-01
Štítná
žláza 8,1E-02 1,1E-01 1,8E-01
2,9E-01 5,4E-01
Děloha 9,5E-02 1,2E-01 1,8E-01
2,8E-01 4,9E-01
Ostatní
tkáně 1,2E-01 1.4E-01 2,1E-01
3,1E-01 5,6E-01
Efektivní dávkový 7,0E-01 9,3E-01 1,4E+00 2,1E+00 3,7E+00
ekvivalent (mSv/MBq)
Efektivní
dávkový ekvivalent po aplikaci 30 MBq leukocytů značených 111In je
17,7 mSv.
Efektivní
dávkový ekvivalent po aplikaci 18,5 MBq trombocytů značených 111In
je 13 mSv.
Uvedené
efektivní dávkové ekvivalenty jsou přibližně stejné jako v případě provedení
běžných radiologických vyšetření.
Aplikace
3 MBq značených leukocytů velmi malým dětem (mladším než 1 rok) způsobí
absorbovanou dávku pro slezinu 90 mGy a efektivní dávkový ekvivalent 9,6 mSv.
Aplikace trombocytů značených 111In způsobí ve stejném případě
absorbovanou dávku pro slezinu 76 mGy a efektivní dávkový ekvivalent 6,8
mSv.
Jako
radionuklidová nečistota 111In může být přítomen izotop india(114mIn).
Má delší poločas rozpadu (49,5 dne) než 111In a může proto s časem
zvyšovat příspěvek k celkové radiační zátěži. Krevní elementy značené 111In
mají být aplikovány nejpozději 1 den po referenčním datu 111In-oxinu,
tehdy je zabezpečeno, že množství india(114mIn) je nižší než 0,2 %.
Efektivní
dávkový ekvivalent pro leukocyty a trombocyty značené indiem(114mIn)
podle ICRP je následující:
Efektivní
dávkový ekvivalent (mSv/MBq):
dospělý
15 let 10 let 5 let 1
rok
114mIn-leukocyty 6,9E+01 9,3E+01 1,5E+02 2,5E+02 4,9E+02
114mIn-trombocyty 8,3E+01 1,2E+02 2,0E+02 3,2E+02 6,2E+02
Nejsou
k dispozici dozimetrické údaje pro erytrocyty značené 111In. Při
použití obdobné metodiky je vypočtený efektivní dávkový ekvivalent následující:
Efektivní
dávkový ekvivalent (mSv/MBq):
dospělý
15 let 10 let 5 let 1 rok
4,0E-01
4,0E-01 7,0E-01 1,1E+00 2,0E+00
Po aplikaci
18,5 MBq erytrocytů značených indiem(111In) je efektivní dávkový
ekvivalent 7,4 mSv.
6. FARMACEUTICKÉ ÚDAJE
6.1. Seznam všech pomocných látek
Indium(111In)
Oxinate:
Octan
sodný, chlorid sodný, železo, kyselina chlorovodíková, voda pro injekce.
pH =
2,5 - 3,5
Tlumivý
roztok::
Tris(hydroxymethyl)aminomethan,
kyselina chlorovodíková, voda pro injekce.
pH =
7,9 - 8,1
6.2. Inkompatibility
Indium(111In)
oxin je nespecifická látka pro značení krevních elementů a v přítomnosti plné
krve rychle vytváří 111In značený transferin. Proto je nutné
zajistit odstranění všech nežádoucích elementů a krevních proteinů při procesu
separace.
Veškeré
laboratorní sklo použité při přípravě reagencií pro značení musí být dokonale
čisté bez přítomnosti kovových nečistot.
6.3. Doba použitelnosti
Doba
použitelnosti přípravku Indium (111In) oxinate je 1 den od data a
hodiny kalibrace. Datum exspirace je uvedeno na obalu každé lahvičky a na
vnějším obalu. Doba použitelnosti tlumivého roztoku je 3 roky od data výroby.
6.4. Skladování
Přípravek
se skladuje při teplotě 15 - 25oC (obyčejná teplota).
Přípravek
neobsahuje žádnou antimikrobiální přísadu.
Skladování
musí být v souladu s příslušnými předpisy pro manipulaci s radioaktivním
materiálem.
6.5. Druh obalu
Injekční
10 ml lékovka, uzavřená pryžovou zátkou a kovovou objímkou, vložená do
olověného stínění.
Tři
skleněné lékovky tlumivého roztoku.
6.6. Návod k použití
Příprava
radiofarmak musí být v souladu jak s příslušnými předpisy pro ochranu zdraví
před ionizujícím zářením, tak s požadavky na kvalitu IVLP. Je nutné dodržovat
zásady aseptické práce a správné výrobní praxe pro radiofarmaka v zájmu
zajištění sterility procesu značení a zajištění sterility roztoku 111In-oxinu.
Vzhledem
k nízkému množství chemických látek přítomných ve výrobku nejsou s výjímkou
patřičných zásad farmaceutického a radiohygienického charakteru doporučeny
žádné zvláštní pokyny pro práci.
Je
nutné dodržovat běžné zásady pro práci s radioaktivním materiálem.
Po
ukončení práce je veškerý použitý materiál včetně nevyužitých částí výrobků a
kontejnerů považován za radioaktivní a jeho likvidace musí být plně v souladu s
příslušnými předpisy. Kontaminované předměty musí být odstraňovány jako
radioaktivní odpad v souladu s příslušnými předpisy.
Návod ke značení leukocytů
1. Do
50 ml stříkačky přidejte 4,5 ml ACD, 30 ml krve a 3 ml hydroxyethylškrobu.
2.
Opatrně promíchejte a nechte sedimentovat na stojánku po dobu 45 - 60 minut.
3.
Přemístěte plasmu bohatou na trombocyty (PLRP) do sterilní zkumavky nebo
lahvičky pomocí trojcestného kohoutu. Je nutné zamezit kontaktu s erytrocyty.
4.
Proveďte centrifugaci PLRP při 130 - 170 g po dobu 5 - 10 minut.
5.
Přemístěte veškerý supernatant do sterilní zkumavcky nebo lahvičky.
6.
Resuspendujte peletku ve 2 ml (v PBS nebo 0,9 % roztoku chloridu sodného.
7. Proveďte centrifugaci
supernatantu při 1000 g po dobu 10 minut.
8. Přemístěte supernatant do
sterilní lahvičky.
9. Přidejte 10,4 ml Tris pufru do 1
ml In-oxinu
10. Nechte reagovat 4 - 37 MBq
In-oxinu se supernatantem po dobu 15 minut
11. Proveďte úpravu plasmy na pH 6,5
(0,8 ml ACD / 10 ml plasmy)
12. Přidejte 5 ml ACD-plasmy do
znhačené směsi
13. Proveďte centrifugaci při 170 g po dobu 5 minut a uschovejte
supernatant pro změření aktivity (=A)
14. Resuspendujte ve 2 - 5 ml
ACD-plasmy a změřte aktivitu (=B)
15. Vypočtěte účinnost značení
(=B/A+B)
Návod ke značení trombocytů
K 7,5 ml ACD přidejte 42,5 ml krve a
proveďte centrifugaci při 200 g po dobu 15 minut. Supernatant - plasmu bohatou
na trombocyty (PRP) odeberte pomocí stříkačky a proveďte acidifikaci pomocí ACD
v množství 0,1 ml/ml PRP. Poté prveďte centrifugaci při 640 g.
Odstraňte supernatant - plasmu chudou
na trombocyty (PPP) a resuspendujte peletku v 3 ml 0,9 % roztoku chloridu
sodného.
Přidejte 0,4 ml Tris pufru k 1 ml
In-oxinu. Do suspenze trombocytů přidejte 4 - 37 MBq 111In-oxinu ke
značení. Nechte reagovat při obyčejné teplotě po dobu 20 minut. Poté doplňte
PPP do objemu 5 ml a určete aktivitu.
Volné nenavázané indium(111In)
je možné oddělit jako supernatant centrifugací při 1000 g po dobu 15 minut.
Tromboycyty jsou resuspendovány při v 3 ml PPP.
Další PPP přidejte do objemu 5 ml a
určete aktivitu pro výpočet účinnosti označení. Suspenze označených trombocytů
je poté možno aplikovat pacientovi.
7. DRŽITEL REGISTRAČNÍHO ROZHODNUTÍ
Mallinckrodt Medical B.V.
Westerduinweg 3
1755 LE PETTEN
Nizozemsko
8. ČÍSLO REGISTRACE
88/381/93-C
9. DATUM REGISTRACE
12.5.1993
10. DATUM POSLEDNÍ REVIZE TEXTU
25.6.2003
